• Нравится 2
Перейти к публикации

Tapalpa \ пшеница \ овес \ агар

Оцените эту тему


phin

Рекомендованные сообщения

Шалом , друзья! 

Небольшое предисловие : от добрых людей был получен  принт Tapalpa , из которого была приготовлена споровая взвесь. 5 шприцев - 2 с гентамицином, 3 без . Логика была обусловлена тем, что хранение взвеси с антибиотиками имеет множество противоречивых мнений, так что разберемся по ходу и заодно протестим подумал я.

 

Далее по порядку:

  • посевной материал - пшеница, овес . На первую партию (4 банки 0.5л) взял по 0.5л сухого зерна ;
  • зерно замочено на сутки, с левомицетином из расчета 0.5 таблетки на банку, к слову тут я допустил ошибку и не промыл зерно через 12 часов, овес начал немного бродить;
  • после замачивания отправил варится на 10-15 мин;
  • готовое зерно рассыпал по банкам с вермикулитом на дне;
  • банки обычные с крышками твист офф (откручиваются руками), в крышках отверстия, заклеенные пластырем, сверху обернул фольгой;
  • отправил банки на стерилизацию, в скороварку влазит в аккурат 4 банки по 0.5л;
  • стерилизовал дробно, 2 раза по часу с лишним,  с перерывом в сутки;
  • после того как банки остыли, была произведена инокуляция, (споры были без регидратации, из принта практически сразу в банки) и дальнейший переезд в теплое сухое место;
  • банки были освоены уверенно, к сожалению не только мицелием, на 2х была зеленая плесень, на 1й черная;
  • из 4х в итоге выжила 1 банка;

 

Фото чемпиона

 

41600058_1(62).thumb.jpg.e2a9f8e09222bb2927a120050adfefca.jpg

Тем не менее, из одной зараженной банки, пока очаг был достаточна мал, был взят забор обросшего зерна в чашки петри на агаровую среду. К слову с чашками такая история была -  заказывал одноразовые пэт чашки, и либо мискликнул на сайте, либо в магазине перепутали  , вобщем прислали 1 пачку нормальных 90мм и 2 пачки 60мм (маленькие), деваться было некуда, подумал что на маленьких тоже можно потренироваться:

 

  • агар был приготовлен из 1 литра дистиллированной воды, в которой было отварено ~200гр картофеля и 20 гр 900го агара ;
  • пока разливал агар по чашкам, образовалось немало конденсата,  решается хранением чашек в перевернутом виде;
  • зерно было перенесено пинцетом из банки в SABе на агар в чашки;

 

Чашки обросли достаточно быстро

1926249425_1(8).thumb.jpg.553d48ce7d0097d2729e7a86a2b9187e.jpg1019998207_1(11).thumb.jpg.753c06565288cfd305a374eac36d0819.jpg

1518494223_1(9).thumb.jpg.9203ece9208cc6597a9e2da3ad151b94.jpg154508767_1(14).thumb.jpg.2b6100b0333d88fa0a98b1f2c762c1da.jpg

 

 

 

1 чашка 'заболела'  на первом фото, на втором для сравнения здоровая, видно что агар прозрачный ничего постороннего на первый взгляд нет:

384196190_1(12).thumb.jpg.84d11bca59b3d7f6a4d38a937d52695d.jpg52912630_1(10).thumb.jpg.ec961dad0b66bf45e3fef184b9e99f70.jpg

 

 

 

Из обросших чашек, сделал забор мицелия в свежие чашки - попробовать выделить чистую  культуру .

 

Агар сделал на воде, которая осталась после приготовления пшеницы - 1 к 4 с дистилированной водой , 20 гр на литр 1200 агара , краситель фуксия. Стерилизовал в удобной как мне казалось медицинской бутылке 400 мл, в скороварку она не помещается в полный рост, пришлось ее класть на бок, конечно в процессе весь агар вылился  - пришлось переделывать .

 

Удобство бутылки - в узком горлышке , которое разливает по чашкам почти без потерь . Пока разливал агар, понял что нужен бокс побольше после перевернутой стопки из 3х маленьких чашек петри с агаром

12.thumb.jpg.5e6cb0bdd0438047e5250e62ba0fd130.jpg379367923_1(13).thumb.jpg.07f3ffbd9e3e00a6b1b0be7e5358a7cb.jpg

 

 

 

После того как мицелий был перенесен из одних чашек в другие, я сделал то, с чего следовало начать гров : заразил свежие чашки спорами . Петли перед забором спор не макал в агар, т.к принт на бумаге -  стремно было испачкать его и испортить, просто поелозил по принту и по аналогии с агаром. Петли использовал одноразовые из пластика (верхний ряд чашек  с мицелием, нижний со спорами):

123.thumb.jpg.8ed1d05975fc8ca624283b139440094e.jpg1714614617_2(2).thumb.jpg.ca0ae4dc5e6feedc418ee60e7bc1d716.jpg

 

 

Пока обрастали банки из первой партии, в шприцах проросли споры, уверенности в успехе прибавилось и была заражена новая партия из 4х банок. Алгоритм тот же, из изменений - сменил крышки на фольгу в 4 слоя и микропористый пластырь 3M , которым заклеил отверстия для инокуляции в 2 слоя. В этот раз тоже пересушил пшеницу, не смотря на то что не сушил на полотенце , решил проблему добавлением 10 мл воды.

 

Процесс

79348928_1(7).thumb.jpg.de3b80404358c04cf078513eaf82672a.jpg573705600_2(5).thumb.jpg.796771114add18c74a544a722fc399bd.jpg

 

 

Тем временем в шприцах выросли медузы, думаю пересадить на жидкую среду. Пока живут в холодильнике.

146491366_2(1).thumb.jpg.337cf359855859f352081c44242e0a9a.jpg196183643_2(3).thumb.jpg.6b2cd9c20c0e547df557c2c94bf2f206.jpg

1735366459_2(7).thumb.jpg.ba7b6fdcf4c43987c639284e02fce5c8.jpg1249275080_2(8).thumb.jpg.94f4209b05c0deed870d1cd99e98434a.jpg

 

 

Общий план

 

 

1972956090_1(1).thumb.jpg.c7f8d9f625550038747615f4a55befee.jpg

 

Продолжение следует, всем добра

 

 

 

 

Изменено пользователем phin
лишние фото
Ссылка на комментарий
Поделиться на других сайтах

И снова здравствуйте

Спасибо, всем кто заглядывает за внимание.

 

Собственно , зашел поделиться новостями:

1.  Одна банка была переселена в кейс в связи с полной колонизацией зерна.

911133478_wq(28).thumb.jpg.a702d29c7bcfa938a239e7ca540e670b.jpg

 

Кейс : 0.5л банка зерна + примерно 0.8л субстрата . Субстрата вероятно можно было больше , но я что -то пожадничал . Посмотрим что получится.

 

Субстрат : 65\30\5 - кокос\торфогрунт для пальмы (но это не точно) \ вермик (5 это довольно приблизительно, возможно меньше)

 

 

1713039766_wq(21).thumb.jpg.81c93e2b74cf878475309154e48f1ac8.jpg

 

 

2. Остальные 4 банки на низком старте + 2 , которые стартанули позже:

620579061_wq(16).thumb.jpg.5f9d133d7ad0536258d398281d338369.jpg1406706247_wq(15).thumb.jpg.fb95967aeb45bbd2a5deb6b505b8dd00.jpg1626306126_wq(18).thumb.jpg.daebb12624dcb84304f97a3ac00db1c3.jpg

 

 

3. Петри с агаром на пшенице как и следовало ожидать особо успехов не показывают, нужно было все таки переделать нормально агар. В процессе стерилизации в бутылку явно попало много воды + часть вытекло как следствие очень бедная питательная среда, на которой мицелий растет жиденький.

 

Фото чашек с пересаженным мицелием:

194377342_wq(9).thumb.jpg.a67257bcd4220d7c37bfa5e1104416bb.jpg1692234224_wq(10).thumb.jpg.219e9c62d3cb3b02426c78b37c4ce74f.jpg

 

Фото чашек со спорами :

1255397391_wq(19).thumb.jpg.27e46cc386b2e07c47c3d63b559b616d.jpg43027216_wq(23).thumb.jpg.9877798b1e136c8052bade55443d9c44.jpg

566095246_wq(25).thumb.jpg.45128eba3fba5d20f482e6c624ce29b9.jpg390063783_wq(24).thumb.jpg.f71abdaff09bc50da16f9a6f065f28d0.jpg

 

Вобщем рост вроде и есть, споры проросли, но как то все вяло.Мицелий воздушный.

 

 

Любопытно , что в чашках, из которых брал миц, он стал более пушистый\плотный (после открытия и забора материала) возможно кто то объяснит  природу этого . У самого еще руки не дошли найти инфу.

1610238549_wq(12).thumb.jpg.d5fcc5633db47996c852d1fe324f8a36.jpg1401001519_wq(11).thumb.jpg.aab3c37ee1b6c2eb8f6dd6996a9f268a.jpg

 

4. Сделал нормальный агар   :

 

Питательная среда : ~120гр картофеля, 600мл дистилированной воды, 10гр глюкозы, 8 гр 1200го агара.

Использовал оставшиеся 10 маленьких(60мм) чашек , надеюсь на этой неделе доедут нормальные, с засечками на дне, чтоб не ездили и полями для надписей. 5 чашек были засеяны спорами, другие 5 зерном\нитями, которые осталось в банке после кейсинга. Еще был засеян 1 флакон, просто из любознательности. Думаю я не одинок , в том что процесс выращивания порой захватывает больше результата.

1905092916_wq(6).thumb.jpg.794ece1db839dcbff1aac07b5a789173.jpg1234494640_wq(1).thumb.jpg.980f9b3d17f9287d0d8d27d0b3a3ef54.jpg

 

 

5. Разбавлю немного гров фотками конского навоза, который сегодня попался пока были на прогулке(сперва попались кони, навоз как следствие):

814180226_wq(33).thumb.jpg.9090bb1e4bcc90b810275ca68c1c6e92.jpg663985957_wq(38).thumb.jpg.0c3ebf7c2e781884f3c182f71fe979a8.jpg

 

Собственно эта спонтанная находка определила следующий стрейн для грова, благо с собой был пакет.

 

 

Всем добра)

 

To be continued...

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Изменено пользователем phin
Ссылка на комментарий
Поделиться на других сайтах

Вторая фотография агара, левая чашка - несмотря на бедный агар, мицелий показывает ризоморфный рост, что говорит о его сильной жизнеспособности. Переноси те "кисточки" в новые чашки. Это будет очень хороший посадочный материал.

 

Изменено пользователем Hamsabala
Ссылка на комментарий
Поделиться на других сайтах

  • 2 недели спустя...

Шалом, уважаемые друзья!

 

В связи с недолгим отъездом, вынужден был оставить хозяйство на несколько дней.

 

Итак, результаты первой закейшеной банки:

955867821_3(2).thumb.jpg.41f00da26e454f4fed35f09ccf22eda4.jpg

 

Газон подъела плесень , терять было особо нечего подумал я , и ампутировал кусок с плесенью.

 

Здоровый кусок был замотан в фольгу и поселен в баклажку 7.07

802126203_3(8).thumb.jpg.3ca8e0b76a940a8b04beb4f775cb5138.jpg301757451_3(20).thumb.jpg.17d005a358297bf8bd54f0a99abb06a6.jpg

 

 

Импровизированный парник стоит на коврике с подогревом, за это время средняя температура было 29 С, сейчас 26-27.

Внимание вопрос знатокам -  на сегодня 13.07,  все еще нет видимых зачатков грибов , подождать еще несколько дней либо отправлять в холодильник? 

 

1328101870_3(21).thumb.jpg.09fb1509e0c541a5ced24311d5d4684b.jpg1696249077_3(22).thumb.jpg.232d272f3b2fe2e97f093e052148a8a8.jpg1787639434_3(23).thumb.jpg.daaed8ef7597982447feb7eec26fcce9.jpg

 

Касательно остальных банок - закейсил 4 штуки. 2 примерно 9.07 и еще 2 12.07 :

 

Первая партия и все 4 вместе

184199670_3(17).thumb.jpg.d3b0059c8428985a4f9c45b0f4254dc8.jpg1215672556_3(7).thumb.jpg.cdff787923fa37d32a27c5d3bc1a956c.jpg

 

2 кейса перемешал зерно с субстратом + покровной слой, остальные 2 - сделал сендвич: земля-обросшее зерно-земля.

 

Осталось 2 банки, которые обрастают, одна почти обросла, вторая из за сухости двигается медленнее:

1768386802_3(16).thumb.jpg.1f90c93923ace1431f21606f75fde5e8.jpg

 

На более питательном агаре споры высаженные 29.06 прорастают не в пример бодрее бедной среды :

 

32.thumb.jpg.99af7537834a7c022205690711f81d5b.jpg1892489625_3(14).thumb.jpg.3092bac407d7164a7f9618bd63b83392.jpg

 

В паре чашек появилась бактериалка либо что то подобное, но это явно не миц:

1968703431_Inked3(13)_LI.thumb.jpg.e972dbd5482b67d3ddeef7b6d4532105.jpg

 

 

Пересаженное 29.06 зерно аналогично:

797179257_3(10).thumb.jpg.c9fa3d2050f869cd3a7939f5638f39bf.jpg235299890_3(19).thumb.jpg.044f45f725f930f4c8ace56e9980563a.jpg1583074862_3(18).thumb.jpg.6f3f15474856470b2467bddbd2a8e919.jpg

 

В одной петри замечены темно-синие точки похожие на плесень (на фото видно не очень четко, но они есть):

179241039_3(12).thumb.jpg.dc2a1d24e73d49c4077e83ea4ba671de.jpg

 

Ссылка на комментарий
Поделиться на других сайтах

25 минут назад, phin сказал:

Пересаженное 29.06 зерно аналогично:

красивые бутылочки  и без конденсата....

 

 

25 минут назад, phin сказал:

Первая партия и все 4 вместе

Первую партию пора переводить на формирование примордий.

 

 

26 минут назад, phin сказал:

Здоровый кусок был замотан в фольгу и поселен в баклажку 7.07

Он готов начать плодоносить, но ему влажно

Ссылка на комментарий
Поделиться на других сайтах

@Hamsabala  спасибо, у флакона вентилируемая крышка как на фото у нижнего, конденсат не собирается

236085587_12(6).jpg.ce053113f57c66737177a748341ee03a.jpg

 

 

Я не стал исключением - меня настигла плесень в кейках . Плата за использование грунта , кроме кокоса. В том грунте для пальм , который добавлял - куча волокон, торф. Девушка в таком выращивает фиалки, там на поверхности у всех поголовно плесень белая.  Вобщем как я понимаю он вкусная булочка для плесени сколько не стерилизуй. Спора попадает из воздуха и благополучно прорастает. Возможно шансов было б больше дождись я  пока миц полностью покроет грунт . But who knows....  В будущем буду растить кубы в кокосе.

 

 

@Hamsabala как только уменьшил влажность показались грибы из ампутированного кейка, но там вылезла плесень , немного смочил ее перекисью, не знаю поможет ли. Читал что можно солью посыпать. Из средств есть перекись \ хлоргексидин \ соль . Есть еще конечно фундазол,  но вероятно  грибы после него кушать будет не самой лучшей идеей . На фото не оч хорошо видно, но там сине-зеленая плесень:

1487747068_12(11).thumb.jpg.8746ad9dedef8c7bb68424b93dfa44e5.jpg1689360506_12(2).thumb.jpg.6e657b3ffe3cd861f38650fa66499245.jpg

 

Кейк, который зарос меньше поражен визуально больше. Для меня пока не ясно - миц не пророс потому что была плесень, которую не видно, либо плесень появилась там где не успел прорости миц:

 

1815994268_12(3).thumb.jpg.38cdf6cacaf8a63bd28edfbf7060f5f3.jpg887277803_12(9).thumb.jpg.a339824cb67435b5d1614c8d4a1c7487.jpg682046563_12(10).thumb.jpg.cd29dae9cf47920e6cff6f2bedf7b4c2.jpg

 

 

 

Не ясно паутинка или просто миц переувлажненный

491398064_12(5).thumb.jpg.705f6e15bb16f4c3eb4c371e438b9bc3.jpg317494695_12(7).thumb.jpg.84fa45b0385e7976a532d16481456dc1.jpg

 

 

На втором кейке визуально пока все ок, но т.к они стояли рядом - готовлюсь к худшему

1221676337_12(8).thumb.jpg.b3445359827934bb3aad5fd380d75940.jpg972614609_12(1).thumb.jpg.1fd31c384e287bea29065b802404dd08.jpg

 

Температура +25 , свет от настольной лампы,  на дне влажный керамзит, в целом в парнике по влажности ок, проветриваю руками 3 раза в день, пока наблюдаю. Советы по борьбе с плесенью приветствуются - просто выкинуть жалко)

 

Ссылка на комментарий
Поделиться на других сайтах

Присоединяйтесь к обсуждению

Вы можете опубликовать сообщение сейчас, а зарегистрироваться позже. Если у вас есть аккаунт, войдите в него для написания от своего имени.
Примечание: вашему сообщению потребуется утверждение модератора, прежде чем оно станет доступным.

Гость
Ответить в теме...

×   Вставлено в виде отформатированного текста.   Восстановить форматирование

  Разрешено не более 75 эмодзи.

×   Ваша ссылка была автоматически встроена.   Отобразить как ссылку

×   Ваш предыдущий контент был восстановлен.   Очистить редактор

×   Вы не можете вставить изображения напрямую. Загрузите или вставьте изображения по ссылке.

  • Сейчас на странице   0 пользователей

    • Нет пользователей, просматривающих эту страницу.
×
×
  • Создать...